在檢定紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的實(shí)踐中，有較多以棱鏡分光的儀器，在檢定它們的透射比時(shí)，在被檢的個(gè)別波長(zhǎng)點(diǎn)出，如果不加入儀器所配置的濾色片，則有嚴(yán)重的偏低現(xiàn)象，如加入濾色片則有明顯的提高，這種顯然是由于雜散光引起的異?，F(xiàn)象，過(guò)去人們一直因?yàn)榘淳€(xiàn)性的檢定規(guī)程檢定時(shí)未能檢出雜散光而被忽視，因此到目前為止還沒(méi)有人對(duì)產(chǎn)生這種現(xiàn)象做認(rèn)真仔細(xì)的分析。下面將做具體的分析，以供堵著有一個(gè)明確客觀的認(rèn)識(shí)。

   理論推導(dǎo)：我們知道標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的透射比特性曲線(xiàn)，任何一個(gè)分光系統(tǒng)都無(wú)法獲得單一波長(zhǎng)的光，比色分析中所謂的單色光是指一定光譜帶寬的光束，這事容易理解的，透射比的誤差與雜散光成正比，當(dāng)雜散光一定時(shí)，T值越大，誤差表現(xiàn)的也越明顯。

   關(guān)于加入濾色片后光譜帶寬變大的影響：為了除去雜散光，在實(shí)際檢定過(guò)程中需要進(jìn)行濾光，但加入濾光片后將減弱光強(qiáng)，對(duì)有些分光光度計(jì)就需要調(diào)大狹縫寬度來(lái)補(bǔ)償光強(qiáng)的減弱，使空白值調(diào)到100%T，這樣顯然會(huì)增大光譜帶寬，增大光譜帶寬不會(huì)帶來(lái)前文提及的異常現(xiàn)象。實(shí)踐說(shuō)明，加入濾色片后的測(cè)得值在透射比峰值處稍低些，但基本上無(wú)明顯的變化，這與前文中的異?，F(xiàn)象無(wú)關(guān)，排除了異?，F(xiàn)象是由于加入濾色片后因帶寬增加而帶來(lái)透射比值提高的可能性。

   雜散光波長(zhǎng)的推測(cè)及雜散光含量的估算：標(biāo)準(zhǔn)溶液選擇了235nm，257nm，313nm，350nm；紫外標(biāo)準(zhǔn)濾光片選取了270nm，293nm，350nm。主要討論標(biāo)準(zhǔn)溶液的313nm和紫外標(biāo)準(zhǔn)濾光片的350nm處，因?yàn)檫@兩點(diǎn)處透射率受雜散光影響時(shí)，透射率數(shù)值明顯上偏差。測(cè)定值總是偏低的，因?yàn)檫@兩點(diǎn)是極大值點(diǎn)，根據(jù)前述的理論推導(dǎo)這是不難理解的。但雜散光究竟是來(lái)自長(zhǎng)波方向還是短波方向，按現(xiàn)行的單光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢定規(guī)程檢定方法可以查出來(lái)自長(zhǎng)波方向雜散光，但由于來(lái)自短波方向的雜散光則無(wú)法查出。在實(shí)際工作中，很多一起按現(xiàn)行規(guī)程檢測(cè)出雜散光后透射比的異?，F(xiàn)象仍然存在，這就說(shuō)明了還有來(lái)自短波方向的雜散光。